アフィニティークロマトグラフィー分離剤 プロテインA樹脂
Praesto® Jetted A50
Praesto® Jetted A50は世界市場において初めて開発された、均一粒径タイプのアガロース樹脂母体のアフィニティークロマトグラフィー用分離剤のプロテインA担体です。
イオン交換樹脂市場における世界大手メーカーのピュロライト社が40年にわたり培ってきたビード生産技術に、ピュロライト社ライフサイエンス事業部のアガロース樹脂製造技術の組み合わせによりPraesto® Jetted A50は開発されました。
Praesto® Jetted A50の主な特徴
- 高い動的結合容量（DBC）：～80 g/L、従来の市場における主要製品と比較し40%高い結合容量
- OPUS®プレパックカラムに充填した製品供給が可能
図1：Praesto® Jetted A50と他社品のDBC比較
10%ブレイクでのDBC
図2：Praesto® Jetted A50の耐アルカリ性比較
0.5M NaOHを一定の時間で接触させ、保持時間6 minにおける初期DBCからの低下を測定
Jetting（ジェッティング）：均一粒径ビード
市場に出回っている多くのアガロース樹脂は、約50年前からバッチ乳化方法で製造されてきました。ジェッティング重合方法はピュロライト社が世界で初めて開発に成功した均一粒径ビードの製造方法です。ジェッティングにより製造されたアガロース樹脂は、従来法により製造されたアガロース樹脂と比較し、均一な粒径範囲が得られ様々な優位性を示します。
- 高い流速/線速度での運転が可能
- 圧力損失を低く抑えることが可能
- ビードの比表面積が大きくなることでDBCが高くなる
- カラム選択性とカラム効率が向上する
- カラム充填性が向上する
均一粒径ビードはスケールアップ全体でカラムの性能がより安定し、結果の再現性が得られやすくなる利点があります。
ジェッティングは、ピュロライト社の特許取得済みの連続生産法です。この合理的で効率的な生産法は、大幅なリードタイムの短縮だけでなく、処理水や廃棄物の減少に伴う環境負荷の低減やコストの削減にも貢献しています。
図3：Praesto® Jetted A50の圧力損失データ
試験条件：2.6 cm直径カラム・20 cm BH
図4：Praesto® Jetted A50と他社品の粒度分布比較
表1：Praesto® Jetted A50の一般物性値
| 製品名 | Praesto® Jetted A50 |
| 用途 | MAb回収 |
| 樹脂母体 | 高架橋度アガロース樹脂 |
| 外観 | 均一粒径 球状ビード |
| リガンド | Repligen® NGL-Impact® A 組換えProtein A (E. coli) |
| 動的結合容量（DBC） | ～80 mg ヒトIgG/mL 樹脂 |
| 耐アルカリ性 | 0.1M NaOHで100時間以上 |
| 平均粒径（d50） | 50 μm |
| 粒度範囲 | 35～90 μm、95%以上 |
| 流速 | ~ 200 cm/h（30 x 20 cm BHカラム） |
| pH安定性（長時間） | 3-12 |
| pH安定性（短時間） | 2-13 |
| 推奨保管条件 | 2～8°C、20%エタノール浸漬 |
Praesto® Jetted A50 HipH
Praesto® Jetted A50 HipHは、酸性で変性しやすい抗体用に設計したプロテインA樹脂です。
Praesto® Jetted A50 HipH の独自の特性により、プロテインA樹脂からの溶出に使用される酸性（pH 3 ～ pH 3.5）で不安定となるpH感受性の抗体およびFc領域含有タンパク質の問題に対応することが可能となります。高い耐アルカリ性、高い動的結合容量に加えて、中性に近い溶出（～pH 5）での回収が実現します。
Praesto® Jetted A50 HipHの主な特徴
- 高い動的結合容量（DBC）：～60 g/L
- pH 3.5 – 5.0での溶出が可能
図5：Praesto® Jetted A50 HipHとPraesto® Jetted A50の溶出pH値と回収率の比較
図6：Praesto® Jetted A50 HipHとPraesto® Jetted A50のDBC比較
10%ブレイクでのDBC
表2：Praesto® Jetted A50 HipHの一般物性値
| 製品名 | Praesto® Jetted A50 HipH |
| 用途 | MAb回収 |
| 樹脂母体 | 高架橋度アガロース樹脂 |
| 外観 | 均一粒径 球状ビード |
| リガンド | Repligen® NGL-Impact® A HipH 組換えProtein A (E. coli) |
| 動的結合容量（DBC） | ～60 mg ヒトIgG/mL 樹脂 |
| 耐アルカリ性 | 0.1M NaOHで100時間以上 |
| 平均粒径（d50） | 50 μm |
| 粒度範囲 | 35～90 μm、95%以上 |
| 流速 | ～200 cm/h（30 x 20 cm BHカラム） |
| pH安定性（長時間） | 3-12 |
| pH安定性（短時間） | 2-13 |
| 推奨保管条件 | 2～8°C、20%エタノール浸漬 |
中間精製・最終精製用イオン交換樹脂
Praesto® SP、Praesto® Q
Praesto® SPは強酸性カチオン交換樹脂、Praesto® Qは強塩基性アニオン交換樹脂で、それぞれ抗体医薬精製の中間精製や最終精製に用いられます。
| 製品名 | Praesto® SP 強酸性カチオン交換樹脂 |
Praesto® Q 強塩基性アニオン交換樹脂 |
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| 樹脂母体 | 高架橋度アガロース樹脂 | 高架橋度アガロース樹脂 | ||||
| 官能基 | スルホン酸 | 4級アンモニウム | ||||
| イオン交換容量 | 0.11-0.18 mmol/mL-R | 0.09-0.18 mmol/mL-R | ||||
| 製品名 | Praesto® SP45 | Praesto® SP65 | Praesto® SP90 | Praesto® Q45 | Praesto® Q65 | Praesto® Q90 |
| 平均粒径（d50） | 45 μm | 65 μm | 90 μm | 45 μm | 65 μm | 90 μm |
| 流速 | 200 cm/h | 400 cm/h | 800 cm/h | 200 cm/h | 400 cm/h | 800 cm/h |
| 動的結合容量（DBC） | 80 mg hIgG | 70 mg hIgG | 50 mg hIgG | 70 mg BSA | 60 mg BSA |
50 mg BSA |
| pH安定性（短時間） | 3-14 | 2-14 | ||||
| pH安定性（長時間） | 4-13 | 3-13 | ||||
| 化学的安定性 | 一般的に使われる緩衝液（1M NaOH、8M尿素、6Mグアニジン塩酸塩） | |||||
| 避けるべき条件 | 酸化剤、陽イオン系洗剤 | 酸化剤、陰イオン系洗剤 | ||||
| 推奨保管条件 | 4-30℃、20%エタノール浸漬、0.2M酢酸ナトリウム水溶液 | 4-30℃、20%エタノール浸漬 | ||||
- 流速：3bar、2.6 x 20 cm BHカラム
- 動的結合容量（DBC）：接触時間6分間
プレパックカラム
ラボ試験用プレパックカラムとしてPraesto® HT Columns、Praesto® RoboColumns®、Praesto® MiniChrom®の製品揃えがあります。
Praesto® HT Columns
Praesto® HT Columnsはラボ試験用のプレパックカラムです。
Praesto®プロテインA樹脂およびPraesto®イオン交換樹脂を充填した製品があります。容量は1 mLと5 mLの2つのタイプで、ともに樹脂層高さは2.5 cmです。
| 製品名 | Praesto® HT Columns | |
| カラム容量 | 1 mL、5 mL | |
| 材質 | ポリプロピレン | |
| 推奨流速 | 1 mL/min（1 mLカラム） | 1-4 mL/min（5 mLカラム） |
| 最大流速 | 4 mL/min（1 mLカラム） | 20 mL/min（5 mLカラム） |
| 最大圧力（カラム） | 5.0 bar | |
| コネクター | Universal 10-32（1/16″）UNF Threads | |
| 寸法 | 0.7 x 2.5 cm（1 mL）および1.6 x 2.5 cm（5 mL） | |
| 推奨保管条件 | Praesto® -プロテインA樹脂：2-8℃
Praesto® -イオン交換樹脂：4-30℃ |
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Praesto® RoboColumns®
Praesto® RoboColumns®は最小スケールでのラボ試験用のプレパックカラムです。
1セット8本のカラムに200 μLまたは600 μLのPraesto®プロテインA樹脂を充填した製品があります。
| 製品名 | Praesto® RoboColumns® |
| 内径 | 5 mm |
| 樹脂層高さ | 10 mm |
| カラム容量 | 200 μL、600 μL |
| カラム数 | 8カラム |
| 材質 | ポリプロピレン |
| 最大圧力（カラム） | 8.0 bar |
| コネクター | Robotic liquid handling stationsに接続 |
| pH安定性（カラム） | pH 1-14 |
| 避けるべき条件 | ハロゲン系溶媒、ヘキサン |
Praesto® MiniChrom®
Praesto® MiniChromはプロセス開発や各種精製条件のスクリーニングに用いられるプレパックカラムです。
Praesto®プロテインA樹脂およびPraesto®イオン交換樹脂を充填した製品があります。容量1 mL・樹脂層高さ20 mmのタイプと容量1 mL・樹脂層高さ100 mmのタイプが利用いただけます。
| 製品名 | Praesto® MiniChrom® 8 x 20 mm |
Praesto® MiniChrom® 8 x 100 mm |
| 内径 | 8 mm | |
| 樹脂層高さ | 20 mm | 100 mm （2本のカラム接続可能） |
| カラム容量 | 1 mL | 5 mL |
| コネクター | Fingertight 1/16″、female | |
| 材質 | ポリプロピレン | |
| 化学的安定性（カラム） | 一般的に使われる緩衝液、pH 1-14、有機溶媒 | |
| 避けるべき条件 | ハロゲン系溶媒、ヘキサン | |
| 最大圧力（カラム） | 30 bar | |